四大灭菌方式-四大 与三大方式

今天给大家分享一些关于四大杀菌法的问题——四大杀菌法和三大杀菌法。希望对你有帮助。以下是这个问题的总结。让我们来看看。

常见的绝育方法有哪些？

(1)加热灭菌法

高温杀灭微生物(超过最大生长温度)的方法。加热灭菌原理:当高温作用于微生物时，细胞内的生理生化反应速率起初会加快，体内的蛋白质、核酸等温敏物质会随着温度的升高而受到不可逆的破坏，最终导致原生质体的改变和细胞内酶结构的破坏，从而使细胞失去生命功能的协调，停止生长发育。在高温的持续作用下，细胞内原生质凝固，酶结构完全破坏，活性消失，生化反应停止，渗透交换等代谢活动消失，细胞死亡。热力灭菌可分为干热灭菌和湿热灭菌。

1)干热灭菌利用燃烧或干热空气体而没有饱和蒸汽的灭菌方法称为干热灭菌。干热灭菌因其使用方便、方法简单，在生产中被广泛应用。比如火焰灭菌:微生物被火焰直接烧死，所以也叫焚烧灭菌。这种方法彻底、快速，但只适用于金属接种工具、试管口和污染物品的处理。热空气体灭菌法:即在电热恒温干燥箱中用干热空气体灭菌。

2)湿热灭菌是蒸汽灭菌的一种方法。湿热灭菌可分为四种:高压、常压、间歇灭菌和巴氏灭菌。

(1)高压蒸汽灭菌由于高压蒸汽穿透力强，温度高于常压，可以大大缩短灭菌时间，提高工作效率。蛋白质在湿热条件下容易变性。在热蒸汽条件下，120℃20 ~ 30分钟后，所有细菌孢子均可死亡。如果灭菌材料太大，不易穿透，可将压力提高至0.152 MPa，延长至1-2小时。在高压蒸汽灭菌中，灭菌温度随着蒸汽压力的增加而增加(图2-6)。

图2-6高压蒸汽灭菌器

使用高压釜时，高压釜内的空气体应完全排空空并用饱和蒸汽置换。如果不排除空气体，锅内温度会低于同压力下纯饱和蒸汽产生的温度，影响杀菌效果。

该方法适用于各种耐热物品的灭菌，如一般培养基、生理盐水、玻璃器皿、工作服等。使用的蒸汽压力和时间应根据待灭菌物品的性质、体积和容器类型来确定。

(2)常压蒸汽灭菌这是一种利用自然压力和100℃蒸汽的灭菌方法。设备简单，成本低，是目前应用最广泛的。只要造个灶，买1-2口大锅，砖水泥做的，也可以用大铁桶，木桶。大小可以自己决定，但不能太大。最好装800 ~ 1500瓶。设计常压锅时应注意的问题:大小依生产规模而定，最好将锅顶做成拱形，使冷凝水顺着锅内壁流下，不会弄湿棉塞；厨柜要有搁板结构，这样可以分层装载和消毒；炉上应安装温度计，随时观察炉内温度变化；由于杀菌时间长，锅内水分蒸发不够，所以大容量炉内要安装加水装置；灶仓的密封度要尽量高，既提高了杀菌效果，又节省了燃料。蘑菇种植者经常在生产中使用小型蒸汽发生器。蒸汽抽出后直接流入底部有木条并用多层塑料布密封的菌袋堆中进行常压灭菌。这种方法简单省力，不用建炉(图2-7)。常压灭菌一般在水烧开后持续8 ~ 10小时，可闷一夜。

图2-7简单大气灭菌法

(3)常压间歇蒸汽灭菌法这是一种用常压蒸汽反复灭菌的方法。具体方法是将需要灭菌的物品放入锅中，100℃处理1小时左右，杀死微生物的营养细胞，让其冷却到30℃左右，孢子就会萌发，然后用同样的方法加热三次，达到灭菌的目的。该方法可用于不耐热营养物和特殊培养基的灭菌。

(4)低温巴氏杀菌，即在60 ~ 70℃下，经过一定时间杀灭有害微生物的方法。适用于不耐高温物品的消毒。有些介质在高温下会被破坏。这种方法既能杀死病原微生物的营养体，又能防止培养基的成分受到严重破坏。食用菌生产中，培养料的堆积发酵过程就是利用这一原理杀灭病、虫、杂菌。

(2)过滤灭菌法

可分为液体过滤和空气体过滤两种，即通过机械方法设计孔径小于细菌的筛子，制成各种过滤器。通过机械过滤，只有液体培养基或空气体流出筛孔，各种微生物细胞留在筛网上，从而达到灭菌的目的。此方法适用于液体培养基(如动物血清、蛋白质、酶、维生素等)的灭菌。).)和热不稳定气体。洁净工作台的工作原理是将带有细菌空的气体过滤灭菌，形成无菌空气体，从风洞中吹出，使工作台无菌。过滤灭菌最大的优点是不破坏培养基中各种物质的化学成分。常用的过滤器有硅藻土、石棉、陶瓷土、火棉胶和硝酸纤维素滤膜。

(3)辐射灭菌法

利用辐射产生的能量进行灭菌的方法称为辐射灭菌。辐射可分为电离辐射和非电离辐射。α射线、β射线、γ射线、X射线、中子、质子和微波属于电离辐射，而紫外线、臭氧和阳光属于非电离辐射。

1)紫外线杀菌紫外线杀菌的原理是利用紫外线照射。用灯管直接照射细菌，引起光化学反应，诱导细菌细胞质中胸腺嘧啶二聚体的形成，从而抑制DNA复制，引起变性死亡。另一方面，紫外线照射下空气体产生的臭氧(O3)也有一定的杀菌作用。紫外线的有效作用距离为1.2 ~ 2.0米。一般在接种室或培养室上方悬挂紫外线灯，数量视房间大小而定。对于1 ~ 2人操作的接种室，安装一个30瓦的紫外线灯就足够了。每次接种前，应将所有必要的仪器一起放入接种室(箱)，然后打开紫外线灯进行照射。如果接种室较大，开灯2小时，达到灭菌效果；如果很小，只需要开灯半个小时左右就能达到杀菌的效果。由于紫外线的穿透力较弱，即使是普通玻璃也无法过滤，因此只适用于空气体或物体表面的杀菌。紫外线会杀死人体皮肤，尤其是眼睛，所以避免直视，工作时关掉紫外线灯。紫外线消毒时，若工作场所略暗，可提高杀菌效果。细菌在接受致命的紫外线辐射后会立即暴露在可见光下，有些细菌可能会复活。干细胞比湿细胞更耐紫外线，孢子比其营养细胞更耐紫外线。

2)微波杀菌由于微生物的细胞中含有70% ~ 90%的水，水分子在微波电场中被极化，并随着电场方向的变化而旋转。在旋转的过程中，分子间的高速摩擦产生热能，与外界加热不同，能使细胞在短时间内爆炸，而物体本身的温度只是略有上升，从而达到杀菌的效果。用YM7601微波炉杀灭食品中的192万大肠杆菌，只需60秒。

3)臭氧发生器消毒臭氧(O3)具有很强的氧化作用，可以破坏微生物的细胞膜和核酸。O3也是一种瞬态物质，在室温下可以自然分解，还原成氧气。它的杀菌原理其实和紫外线消毒很像。

有哪几种绝育方法？

灭菌方法分为:

1、热力灭菌法

热杀菌利用高温使微生物细胞内的蛋白质全部变性，酶活性消失，导致细胞死亡。通常有干热、湿热和间歇加热灭菌法。

2、干热灭菌

将金属器械或清洗干净的玻璃器皿放入150 ~ 170℃的电烤箱中1 ~ 2小时，可彻底灭菌(包括细菌芽孢)。焚烧是最彻底的干热灭菌方法，其应用范围仅限于接种环和针的灭菌或带有致病菌和动物的物质的焚烧。

3、湿热灭菌

用沸水、蒸汽和压力蒸汽灭菌。

4、间歇灭菌

间歇灭菌3天，每天蒸汽灭菌一次。这种方法适用于不能承受100℃以上温度的物质和一些糖类或蛋白质类物质。通常，蒸汽用于在正常大气压下灭菌1小时。灭菌温度不超过100℃，不会破坏糖分等物质，但可以杀死间歇培养时萌发的孢子，从而达到彻底灭菌的目的。

5、辐射灭菌

辐射灭菌在一定条件下，紫外线是常用的，其他是电离辐射。波长为25000 ~ 80000nm的激光也有很强的杀菌能力，波长为26500nm的激光最有效。辐射灭菌仅限于某一种材料，由于所需设备复杂，难以广泛应用。

6、渗透压灭菌

渗透压灭菌是一种用高渗透压溶液灭菌的方法。在高浓度的盐或糖溶液中，细胞因脱水而与质壁分离，不能进行正常的代谢，导致微生物死亡。

7、化学试剂灭菌

大多数化学药品在低浓度时有抑菌作用，高浓度时有杀菌作用。常用的有5%石炭酸、70%乙醇和乙二醇。化学消毒剂必须是挥发性的，以便从灭菌材料中去除残留药物。